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Le 27e Marines a de nouveau été réactivé au cours de la La guerre du Vietnam le 1er janvier 1966, mais servait principalement de pool pour les nouveaux remplaçants avant leur départ outre-mer. Le 1er bataillon basé à Base aérienne du Corps des Marines Baie de Kaneohe, Hawaii était le seul bataillon avec du personnel affecté en 1966.

En 1967, les 2e et 3e bataillons stationnés sur la côte est des États-Unis ont été renforcés.

Le 12 février 1968, en réponse au Offensive du Têt, Président Lyndon B.Johnson autorisé une augmentation des effectifs des troupes américaines en Sud-Vietnam et le 27e Marines était l'une des unités envoyées. Les 10 et 12 février, le 1er Bataillon, 27th Marines, à Hawaï avait embarqué à bord du USS Vancouver, USS Bexar et le USS Washburn participer à deux exercices d'atterrissage sur Okinawa, mais avec les nouvelles commandes, les navires ont procédé à Đà Nẵng. Entre le 14 et le 21 février, le reste de l'équipe régimentaire de débarquement (RLT) 27 déployée par voie maritime et aérienne depuis Camp Pendleton à Da Nang. Commandement du transport aérien militaire les avions ont transporté plus de 3 300 hommes du régiment de la Californie au Vietnam. Le 17 février, le quartier général du 27e Marines, ainsi que ceux des équipes de débarquement du bataillon (BLT) 2/27 et 3/27 ont ouvert leurs postes de commandement à Da Nang. Les forces arrivant dans le cadre du RLT 27 comprenaient également du personnel du bataillon d'artillerie, 2e Bataillon, 13e Marines. Le 21 février, le USS Thomaston défunt Base navale de San Diego avec les éléments de surface du RLT, quelque 200 personnels et plus de 5 000 tonnes de matériel. À la fin du mois, le 1er bataillon avait rejoint les deux autres bataillons du régiment à Da Nang. Fin février, le 2e bataillon a relevé le 3e Bataillon, 5e Marines et le 3e bataillon a relevé le 2e Bataillon, 3e Marines dans la zone de responsabilité tactique sud-ouest de Da Nang (TAOR). En mars, le 1/27e Marines est resté en réserve tandis que les deux autres bataillons ont effectué plus de 2 900 patrouilles de petites unités tout au long de son TAOR, ce qui a entraîné environ 310 contacts, 182 initiés par les Marines et le reste par le Viêt-cong (CV). À la fin du 1/27 mars, les Marines ont été déplacés vers le nord pour assurer la sécurité de Itinéraire 1 entre Teinte et Base de combat de Phu Bai et la protection de Base Tân Mỹ.

2e Peloton, Compagnie I, 3/27 Marines avec des roquettes de 122 mm capturées

Le 5 mai, une patrouille d'embuscade de sept hommes du 1er bataillon a assassiné cinq civils sud-vietnamiens près de Huế. Cinq des sept Marines ont été reconnus coupables de meurtre.

Le 13 mai, des éléments du 3e bataillon rejoignent Opération Allen Brook. L'ensemble du régiment rejoignit plus tard l'opération et assuma le contrôle opérationnel jusqu'au 3 août.

Le déploiement du régiment à l'étranger n'était destiné qu'à être temporaire et en mars, Johnson a ordonné qu'il devait retourner aux États-Unis avant le 15 juillet, mais cela a été retardé jusqu'en septembre en raison de retards dans la formation des forces de remplacement de l'armée américaine. Le déploiement avait mis à rude épreuve les effectifs du Corps des Marines.

Alors que le régiment préparait son redéploiement aux États-Unis en août, le VC lança son Offensive de phase III et le 1er Bataillon ont participé à la défense de Base aérienne de Danang tandis que le 2e bataillon participait aux opérations pour couper le VC en retraite et Armée populaire du Vietnam (PAVN).

Fin août, le 1er Régiment de Marines était arrivé dans le Da Nang TAOR et il a commencé à relever le régiment. Le 12 septembre, le premier avion du Regiment Marines est parti pour Okinawa et le 17 septembre, le dernier des BLT 1/27 est arrivé à Hawaï.

Un défilé de retour a été présenté comme une cérémonie commémorative au centre-ville de San Diego à la vie que le régiment avait donnée au Sud-Vietnam. L'unité a ensuite été réaffectée au Camp Pendleton dans la zone de la base appelée Camp Margarita ou la zone 33.